www.wikidata.uk-ua.nina.az

Ретеплаза англ Reteplase скорочено від Recombinant t PA або рапілісін рекомбінантний поліпептид що має тромболітичну дію

Ретеплаза

Ретеплаза (англ. — Reteplase, скорочено від Recombinant t-PA) або рапілісін — рекомбінантний поліпептид, що має тромболітичну дію. Фармакологічна дія полягає перетворенні плазміногену (неактивна форма ензиму) на плазмін (активна форма ензиму), в свою чергу, плазмін каталізує лізис тромбу шляхом протеолізу фібринового матриксу до розчинних продуктів деградації. Плазмін активується шляхом обмеженого протеолізу за зв'язком Arg561-Val562. Отримується рекомбінантним шляхом з бактерії E. coli у неактивній формі, що підлягає ренатурації in vitro для переведення в активну форму. Ретеплаза відноситься до фармакологічного класу активаторів плазміну серед яких урокіназа, стрептокіназа[ru], аністреплаза[es] та альтеплаза.

Будова та функції Редагувати

Неглікозильований поліпептид масою 39,6 кДа. Складається з 355 амінокислотних залишків, що включає 1-3 та 176—527 залишків t-PA (тканинного активатора плазміногену людини). Включає 2 домени: kringle 2 та серин-протеазний. На відміну від t-PA не має доменів: kringle -1, finger домену, та домену епітеліального фактору росту (ЕФР). Залишки серину, гістидину та аспартату формують каталітичний центр ферменту. Зближення гістидину, аспартату та серину забезпечується третинною структурою білка.

Отримання Редагувати

Для отримання рекомбінантного препарату використали ген t-PA з бібліотеки клітин меланоми. Шляхом екзон-інтронної реорганізації гену були вилучені ділянки, що кодують домени kringle -1, finger, та ЕФР. Модифікована послідовність була включена у векторну плазміду pKK223-3. Вектор був включений в геном E. coli через трансформацію. Ретеплаза накопичується в клітинах E. coli у вигляді тіл включення. Для виділення ензиму культура клітин оброблялась лізоцимом. З отриманого лізату виокремлюється фракція з ретеплазою, що розчиняється за допомогою суміші гуанідин гідрохлориду та дітіоеритриту. Оскільки ретеплаза це рекомбінантний білок отриманий з бактерії E.coli, то він не проходить пост-трансляційних модифікацій серед яких: утворення дисульфідних зв'язків (всього 9) та глікозилювання. Це і визначає необхідність ренатурації ферменту in vitro. Для відновлення структури ферменту застосовують розчин дисульфідів.

Для оптимізації процесу виробництва ретеплази застосували вектор pBAD/gIIIA, що кодував інформацію про білки екскреції ретеплази. Це полегшило б процес очищення та виокремлення цільового ферменту оскільки робота проводиться з периплазмою та культуральним середовищем. Незважаючи на модифікований вектор, лише невелика частина ретеплази була виявлена поза клітиною.

Порівняння з іншими тромболітиками Редагувати

Урокіназа, стрептокіназа та аністреплаза відносяться до фібрин неспецифічних тромболітиків. Це означає, що їх активність в крові визначається лише наявністю субстрату та концентрацією самого ферменту в крові. Таким чином тромболітики, що не специфічні до фібрину постійно активують плазмін, поза межами кров'яного згустка тим самим сповільнюючи тромболіз (плазмін активатори постійно насичені). Надмірна концентрація цих тромболітиків призводить до зменшення вмісту α1 — антиплазміну, основного інгібітора плазміну, і як наслідок, призводить до підвищення ризику кровотеч.

Якщо порівнювати специфічні до фібрину активатори плазміну з ретеплазою, то остання має більш пролонговану дію. Ця властивість забезпечена видаленням ЕФР домену, що відповідальний за зв'язування зі специфічними рецепторами на поверхні гепатоцитів. Зв'язування з рецептором активує сигнальний каскад, що призводить до поглинання t-PA в клітину. Отже, ЕФР домен відповідає за зменшення концентрації t-PA в крові.

Зміна в структурі оригінального гену t-PA вплинула не тільки на час дії ферменту. Kringle-2 та finger домени відповідають за зв'язування t-PA з фібрином. Видалення останнього призвело до зменшення спорідненості ретеплази до фібрину. Ця модифікація збільшила лабільність ретеплази та дозволила діяти не тільки на поверхні тромбу, а й всередині нього.

Клінічне застосування Редагувати

Тромболітична дія застосовується при лікуванні таких хвороб:

Можливе застосування при введенні судинних катетерів для збільшення їх провідності. Ретеплаза також інгібує АДФ індуковану агрегацію тромбоцитів.

Примітки Редагувати

  1. Noble, Stuart; McTavish, Donna (1 жовтня 1996). Reteplase. Drugs (англ.) 52 (4). с. 589–605. ISSN 1179-1950. doi:10.2165/00003495-199652040-00012. Процитовано 22 червня 2019. 
  2. Smalling, R. W. (2 грудня 1997). Pharmacological and clinical impact of the unique molecular structure of a new plasminogen activator. European Heart Journal 18 (suppl F). с. 11–16. ISSN 0195-668X. doi:10.1093/eurheartj/18.suppl_f.11. Процитовано 22 червня 2019. 
  3. ↑ Tissue Plasminogen Activator (tPA). Diapharma (англ.). Процитовано 22 червня 2019. 
  4. ↑ Waller, Michael; Kohnert, Ulrich (1999). У Walsh, Gary; Murphy, Brendan. Reteplase, a recombinant plasminogen activator. Biopharmaceuticals, an Industrial Perspective (англ.). Dordrecht: Springer Netherlands. с. 185–216. ISBN 9789048152377. doi:10.1007/978-94-017-0926-2_8. 
  5. ↑ Simpson, Dene; Siddiqui, M Asif A; Scott, Lesley J; Hilleman, Daniel E (2006). Reteplase: A Review of its Use in the Management of Thrombotic Occlusive Disorders. American Journal of Cardiovascular Drugs (англ.) 6 (4). с. 265–285. ISSN 1175-3277. doi:10.2165/00129784-200606040-00007. Процитовано 22 червня 2019. 
  6. ↑ Sadeghi, Hamid Mir Mohammad; Jahanian-Najafabadi, Ali; Mahnam, Karim; Seyedhosseini-Ghaheh, Hooria; Mohammadi, Elmira (1 січня 2019). Reteplase: Structure, Function, and Production. Advanced Biomedical Research (англ.) 8 (1). с. 19. ISSN 2277-9175. PMID 31016177. doi:10.4103/2277-9175.254622. Процитовано 22 червня 2019. 
Вікіпедія, Українська, Україна, книга, книги, бібліотека, стаття, читати, завантажити, безкоштовно, безкоштовно завантажити, mp3, відео, mp4, 3gp, jpg, jpeg, gif, png, малюнок, музика, пісня, фільм, книга, гра, ігри
Дата публікації:
Reteplaza angl Reteplase skorocheno vid Recombinant t PA abo rapilisin rekombinantnij polipeptid sho maye trombolitichnu diyu Farmakologichna diya polyagaye peretvorenni plazminogenu neaktivna forma enzimu na plazmin aktivna forma enzimu 1 v svoyu chergu plazmin katalizuye lizis trombu shlyahom proteolizu fibrinovogo matriksu do rozchinnih produktiv degradaciyi 2 Plazmin aktivuyetsya shlyahom obmezhenogo proteolizu za zv yazkom Arg561 Val562 3 Otrimuyetsya rekombinantnim shlyahom z bakteriyi E coli u neaktivnij formi sho pidlyagaye renaturaciyi in vitro dlya perevedennya v aktivnu formu Reteplaza vidnositsya do farmakologichnogo klasu aktivatoriv plazminu sered yakih urokinaza streptokinaza ru anistreplaza es ta alteplaza 4 Zmist 1 Budova ta funkciyi 2 Otrimannya 3 Porivnyannya z inshimi trombolitikami 4 Klinichne zastosuvannya 5 PrimitkiBudova ta funkciyi RedaguvatiNeglikozilovanij polipeptid masoyu 39 6 kDa Skladayetsya z 355 aminokislotnih zalishkiv sho vklyuchaye 1 3 ta 176 527 zalishkiv t PA tkaninnogo aktivatora plazminogenu lyudini Vklyuchaye 2 domeni kringle 2 ta serin proteaznij 5 Na vidminu vid t PA ne maye domeniv kringle 1 finger domenu ta domenu epitelialnogo faktoru rostu EFR Zalishki serinu gistidinu ta aspartatu formuyut katalitichnij centr fermentu Zblizhennya gistidinu aspartatu ta serinu zabezpechuyetsya tretinnoyu strukturoyu bilka 3 Otrimannya RedaguvatiDlya otrimannya rekombinantnogo preparatu vikoristali gen t PA z biblioteki klitin melanomi Shlyahom ekzon intronnoyi reorganizaciyi genu buli vilucheni dilyanki sho koduyut domeni kringle 1 finger ta EFR Modifikovana poslidovnist bula vklyuchena u vektornu plazmidu pKK223 3 Vektor buv vklyuchenij v genom E coli cherez transformaciyu Reteplaza nakopichuyetsya v klitinah E coli u viglyadi til vklyuchennya Dlya vidilennya enzimu kultura klitin obroblyalas lizocimom Z otrimanogo lizatu viokremlyuyetsya frakciya z reteplazoyu sho rozchinyayetsya za dopomogoyu sumishi guanidin gidrohloridu ta ditioeritritu Oskilki reteplaza ce rekombinantnij bilok otrimanij z bakteriyi E coli to vin ne prohodit post translyacijnih modifikacij sered yakih utvorennya disulfidnih zv yazkiv vsogo 9 ta glikozilyuvannya 4 6 Ce i viznachaye neobhidnist renaturaciyi fermentu in vitro Dlya vidnovlennya strukturi fermentu zastosovuyut rozchin disulfidiv Dlya optimizaciyi procesu virobnictva reteplazi zastosuvali vektor pBAD gIIIA sho koduvav informaciyu pro bilki ekskreciyi reteplazi 6 Ce polegshilo b proces ochishennya ta viokremlennya cilovogo fermentu oskilki robota provoditsya z periplazmoyu ta kulturalnim seredovishem Nezvazhayuchi na modifikovanij vektor lishe nevelika chastina reteplazi bula viyavlena poza klitinoyu Porivnyannya z inshimi trombolitikami RedaguvatiUrokinaza streptokinaza ta anistreplaza vidnosyatsya do fibrin nespecifichnih trombolitikiv Ce oznachaye sho yih aktivnist v krovi viznachayetsya lishe nayavnistyu substratu ta koncentraciyeyu samogo fermentu v krovi Takim chinom trombolitiki sho ne specifichni do fibrinu postijno aktivuyut plazmin poza mezhami krov yanogo zgustka tim samim spovilnyuyuchi tromboliz plazmin aktivatori postijno nasicheni Nadmirna koncentraciya cih trombolitikiv prizvodit do zmenshennya vmistu a1 antiplazminu osnovnogo ingibitora plazminu i yak naslidok prizvodit do pidvishennya riziku krovotech 4 Yaksho porivnyuvati specifichni do fibrinu aktivatori plazminu z reteplazoyu to ostannya maye bilsh prolongovanu diyu Cya vlastivist zabezpechena vidalennyam EFR domenu sho vidpovidalnij za zv yazuvannya zi specifichnimi receptorami na poverhni gepatocitiv Zv yazuvannya z receptorom aktivuye signalnij kaskad sho prizvodit do poglinannya t PA v klitinu Otzhe EFR domen vidpovidaye za zmenshennya koncentraciyi t PA v krovi 5 Zmina v strukturi originalnogo genu t PA vplinula ne tilki na chas diyi fermentu Kringle 2 ta finger domeni vidpovidayut za zv yazuvannya t PA z fibrinom Vidalennya ostannogo prizvelo do zmenshennya sporidnenosti reteplazi do fibrinu Cya modifikaciya zbilshila labilnist reteplazi ta dozvolila diyati ne tilki na poverhni trombu a j vseredini nogo 5 Klinichne zastosuvannya RedaguvatiTrombolitichna diya zastosovuyetsya pri likuvanni takih hvorob Gostrij infarkt miokarda Gostrij ishemichnij insult Legeneva emboliyaMozhlive zastosuvannya pri vvedenni sudinnih kateteriv dlya zbilshennya yih providnosti Reteplaza takozh ingibuye ADF indukovanu agregaciyu trombocitiv 5 Primitki Redaguvati Noble Stuart McTavish Donna 1 zhovtnya 1996 Reteplase Drugs angl 52 4 s 589 605 ISSN 1179 1950 doi 10 2165 00003495 199652040 00012 Procitovano 22 chervnya 2019 Smalling R W 2 grudnya 1997 Pharmacological and clinical impact of the unique molecular structure of a new plasminogen activator European Heart Journal 18 suppl F s 11 16 ISSN 0195 668X doi 10 1093 eurheartj 18 suppl f 11 Procitovano 22 chervnya 2019 a b Tissue Plasminogen Activator tPA Diapharma angl Procitovano 22 chervnya 2019 a b v Waller Michael Kohnert Ulrich 1999 U Walsh Gary Murphy Brendan Reteplase a recombinant plasminogen activator Biopharmaceuticals an Industrial Perspective angl Dordrecht Springer Netherlands s 185 216 ISBN 9789048152377 doi 10 1007 978 94 017 0926 2 8 a b v g Simpson Dene Siddiqui M Asif A Scott Lesley J Hilleman Daniel E 2006 Reteplase A Review of its Use in the Management of Thrombotic Occlusive Disorders American Journal of Cardiovascular Drugs angl 6 4 s 265 285 ISSN 1175 3277 doi 10 2165 00129784 200606040 00007 Procitovano 22 chervnya 2019 a b Sadeghi Hamid Mir Mohammad Jahanian Najafabadi Ali Mahnam Karim Seyedhosseini Ghaheh Hooria Mohammadi Elmira 1 sichnya 2019 Reteplase Structure Function and Production Advanced Biomedical Research angl 8 1 s 19 ISSN 2277 9175 PMID 31016177 doi 10 4103 2277 9175 254622 Procitovano 22 chervnya 2019 Otrimano z https uk wikipedia org w index php title Reteplaza amp oldid 37445398