www.wikidata.uk-ua.nina.az
Kosmidi Cosmides plazmidi sho mistyat fragment DNK faga lyambda vklyuchno zi cos dilyankoyu Razom iz sistemami pakuvannya u fagovi chastinki in vitro vikoristovuyutsya yak vektorni molekuli dlya klonuvannya geniv ta pri pobudovi genomnih bibliotek Kosmidi vpershe skonstruyuvali Kollins ta Bryuning 1978 roku Yihnya nazva pohodit vid skorochennya dvoh terminiv cos dilyanka sam termin u svoyu chergu pohodit vid angl cohesive ends lipki kinci ta plazmida Shema klonuvannya DNK u kosmidnomu vektori Kosmida maye rozmir priblizno 5 t p n i obov yazkovo vklyuchaye taki elementi cos dilyanku neobhidnu dlya zapakovuvannya u virioni faga lyambda tochku ori plazmidi dlya replikaciyi u klitini bakteriyi sajti rozpiznavannya endonukleazami restrikciyi ta markernij gen napriklad gen rezistentnosti do yakogos antibiotiku Za dopomogoyu kosmid mozhna klonuvati dilyanki DNK rozmirom 32 47 t p n Dlya cogo kosmidu ta chuzhoridnu DNK obroblyayut odniyeyu i tiyeyu zh endonukleazoyu restrikciyi pislya chogo otrimani linijni fragmenti zmishuyut i provodyat reakciyu liguvannya Dali vidbuvayetsya pakuvannya DNK u fagovi golivki in vitro vona rozrizayetsya u cos dilyankah Cej proces suprovodzhuyetsya selekciyeyu fragmentiv za rozmirom oskilki zapakovuvatis mozhe tilki DNK dovzhinoyu 78 105 vid genomu faga lyambda Takim chinom u virioni potraplyat perevazhno rekombinantni kosmidi sho mistyat klonovanu dilyanku DNK Produkti liguvannya mizh dvoma kosmidami budut zamalimi dlya pakuvannya a mizh dvoma fragmentami chuzhoridnoyi DNK zavelikimi Otrimani fagovi chastinki iz rekombinantnimi kosmidami vikoristovuyut dlya infikuvannya klitin kishkovoyi palichki U citoplazmi kosmidi ciklizuyutsya zavdyaki z yednannyu lipkih kinciv i dali replikuyutsya yak zvichajni plazmidi ne proyavlyayuchi niyakih funkcij faga lyambda Selekciya transformovanih klitin provoditsya za markernim genom prisutnim u vektornij molekuli Modifikaciyi RedaguvatiOskilki kosmidi dayut mozhlivist klonuvati vidnosno veliki dilyanki DNK voni ye zruchnimi vektorami dlya stvorennya bibliotek fragmentiv genomiv eukariot otrimanih shlyahom chastkovogo rozsheplennya endonukleazami restrikciyi Prote produkti takogo rozsheplennya mozhut mati riznij rozmir i mozhlivi vipadki koli vidbuvayetsya liguvannya dvoh vidnosno nevelikih fragmentiv sho ne znahodilis poruch u genomi i stvorennya vidpovidnogo klona yakij davatime hibne uyavlennya pro yih polozhennya v hromosomah Cyu problemu mozhna podolati shlyahom frakcionuvannya produktiv chastkovogo rozsheplennya za rozmirom Prote navit takij metod ne dozvolyaye povnistyu uniknuti viniknennyu kloniv kosmid sho mistyat kilka ligovanih fragmentiv DNK tomu buli zaproponovani inshi metodi zokrema defosforilyuvannya fragmentiv chuzhoridnoyi DNK shob voni ne mogli ob yednuvatis odne z odnim Takozh buli stvoreni specialni kosmidni vektori pJB8 Burke Ish Horowicz 1981 ta c2XB Bates Swift 1983 pri vikoristanni yakih imovirnist utvorennya hibnih kloniv zvoditsya do minimumu Suchasni kosmidi serij pWE ta sCos harakterizuyutsya nayavnistyu kilkoh sajtiv klonuvannya flankovanimi fagovimi promotorami ta unikalnimi dilyankami rozpiznavannya endonukleazami restrikciyi NotI SacII ta SfiI sho dozvolyayut virizati vstavku odnim fragmentom Dzherela RedaguvatiPrimrose S B Twyman R M Old R W 2002 Principles of Gene Manipulation vid 6th Wiley Blackwell ISBN 0632059540 Griffiths A J F Wessler S R et al 2004 An Introduction to Genetic Analysis vid 8th W H Freeman ISBN 978 0716749394 Arhiv originalu za 26 lyutogo 2015 Procitovano 20 kvitnya 2012 Otrimano z https uk wikipedia org w index php title Kosmidi amp oldid 34063051